Tá Javascript díchumasaithe i do bhrabhsálaí faoi láthair.Nuair atá javascript díchumasaithe, ní oibreoidh roinnt feidhmeanna den suíomh Gréasáin seo.
Javier Fidalgo, * Pierre-Antoine Deglesne, * Rodrigo Arroyo, * Lilian Sepúlveda, * Evgeniya Ranneva, Philippe Deprez Roinn na hEolaíochta, Skin Tech Pharma Group, Castello D’Empúries, An Chatalóin, an Spáinn * Tá roinnt léargais ag na húdair seo ar an saothar seo Comhionann Cúlra ranníocaíochta: Is polaisiúicríd a tharlaíonn go nádúrtha é aigéad hyaluronic (HA) a úsáidtear chun líontóirí deirmeacha a tháirgeadh chun críocha aeistéitiúla.Ós rud é go bhfuil leathré aige i bhfíocháin an duine, déantar líontóirí deirmeacha bunaithe ar HA a mhodhnú go ceimiceach chun a saolré sa chorp a leathnú.Is é an modhnú is coitianta i líontóirí tráchtála bunaithe ar HA ná úsáid a bhaint as éitear diglycidyl 1,4-butanediol (BDDE) mar ghníomhaire trasnasctha chun slabhraí HA a thrasnasc.Meastar BDDE iarmharach nó neamh-imoibrithe neamhthocsaineach ag <2 chuid in aghaidh an mhilliúin (ppm);mar sin, ní mór an BDDE iarmharach sa líontóir deirmeach deiridh a chainníochtú chun sábháilteacht othar a chinntiú.Ábhair agus modhanna: Déanann an staidéar seo cur síos ar bhrath agus ar thréithriú seachtháirge den imoibriú tras-nasctha idir BDDE agus HA faoi choinníollacha alcaileach trí chrómatagrafaíocht leachta agus mais-speictriméadracht (LC-MS) a chomhcheangal.Torthaí: Tar éis anailísí éagsúla, fuarthas amach gur chuir na coinníollacha alcaileach agus an teocht ard a úsáideadh chun an hidrogel HA-BDDE a dhíghalrú chun cinn foirmiú an fhotháirge nua seo, an cumaisc "cosúil le glycol próipiléine".Dhearbhaigh anailís LC-MS go bhfuil an mais aon-iseatópach céanna ag an seachtháirge mar BDDE, am coinneála difriúil (tR), agus modh ionsúcháin UV difriúil (λ = 200 nm).Murab ionann agus BDDE, tugadh faoi deara in anailís LC-MS, faoi na coinníollacha tomhais céanna, go bhfuil ráta braite níos airde ag an seachtháirge seo ag 200 nm.Conclúid: Léiríonn na torthaí seo nach bhfuil aon eapocsaíd i struchtúr an chomhdhúil nua seo.Tá an plé oscailte chun measúnú a dhéanamh ar an riosca a bhaineann leis an seachtháirge nua seo a aimsítear i dtáirgeadh hidrea-ghlóine HA-BDDE (líonóir deirmeach HA) chun críocha tráchtála.Eochairfhocail: aigéad hyaluronic, filler deirmeach HA, aigéad hyaluronic tras-nasctha, BDDE, anailís LC-MS, seachtháirge BDDE.
Is iad líontóirí atá bunaithe ar aigéad hyaluronic (HA) na líontóirí deirmeacha is coitianta agus is coitianta a úsáidtear chun críocha cosmaideacha.1 Is hidrogel é an filler deirmeach seo, de ghnáth comhdhéanta de> 95% uisce agus 0.5-3% HA, a thugann struchtúr cosúil le glóthach dóibh.Is polaisiúicríd é 2 HA agus an phríomh-chomhpháirt de mhaitrís eischeallach veirteabraigh.Ceann de na comhábhair.Tá sé comhdhéanta de (1,4)-aigéad glucuronic-β (1,3) -N-acetylglucosamine (GlcNAc) aonaid déshiúicríde athrá ceangailte ag bannaí glycosidic.Tá an patrún déshiúicríde seo mar an gcéanna i ngach orgánach.I gcomparáid le roinnt líontóirí próitéin-bhunaithe (cosúil le collagen), is móilín an-bhith-chomhoiriúnach é HA.Is féidir leis na líontóirí seo sainiúlacht seicheamh aimínaigéad a thaispeáint a d'fhéadfadh córas imdhíonachta an othair a aithint.
Nuair a úsáidtear é mar fhiller deirmeach, is é príomhtheorannú HA a láimhdeachas tapa laistigh de na fíocháin mar gheall ar láithreacht teaghlach sonrach einsímí ar a dtugtar hyaluronidase.Go dtí seo, tá cur síos déanta ar roinnt modhnuithe ceimiceacha i struchtúr HA chun leathré HA i bhfíocháin a mhéadú.3 Déanann an chuid is mó de na modhnuithe seo iarracht rochtain hyaluronidase ar pholaiméirí polaisiúicríde a laghdú trí shlabhraí HA a thrasnascadh.Dá bhrí sin, mar gheall ar fhoirmiú droichid agus na bannaí comhfhiúsacha idirmhóilíneacha idir struchtúr HA agus an gníomhaire tras-nasctha, táirgeann an hidrogel HA tras-nasctha níos mó táirgí díghrádaithe frith-einsím ná an HA nádúrtha.4-6
Go dtí seo, i measc na ngníomhairí ceimiceacha tras-nasctha a úsáidtear chun HA tras-nasctha a tháirgeadh tá methacrylamide, 7 hiodrazide, 8 carbodiimide, 9 divinyl sulfone, 1,4-butanediol diglycidyl éitear (BDDE) Agus polai(glycol eitiléine) éitear diglycidyl.10 ,11 Is é BDDE an gníomhaire trasnasctha is coitianta a úsáidtear faoi láthair.Cé go bhfuil sé cruthaithe go bhfuil na cineálacha hidrogels seo sábháilte le blianta fada anuas, is imoibrithe imoibríocha iad na gníomhairí trasnasctha a úsáidtear a d'fhéadfadh a bheith citotocsaineach agus, i gcásanna áirithe, só-ghineach.12 Dá bhrí sin, ní mór a n-ábhar iarmharach sa hidrogel deiridh a bheith ard.Meastar go bhfuil BDDE sábháilte nuair a bhíonn an tiúchan iarmharach níos lú ná 2 chuid in aghaidh an mhilliúin (ppm).4
Tá roinnt modhanna ann chun tiúchan BDDE íseal-iarmhar a bhrath, céim tras-nasctha agus suíomh ionadach i hidrogels HA, mar shampla crómatagrafaíocht gháis, crómatagrafaíocht eisiata méide i dteannta le mais-speictriméadracht (MS), modhanna tomhais fluaraiseachta athshondas maighnéadach núicléach (NMR), agus Eagar dé-óid cúpláilte crómatagrafaíocht leachta ardfheidhmíochta (HPLC).13-17 Déanann an staidéar seo cur síos ar bhrath agus ar thréithriú seachtháirge sa hidrogel HA tras-nasctha deiridh a tháirgtear trí imoibriú BDDE agus HA faoi choinníollacha alcaileach.HPLC agus crómatagrafaíocht-mhais-speictriméadracht (anailís LC-MS).Ós rud é nach fios tocsaineacht an fhotháirge seo de BDDE, molaimid gur cheart a chainníochtú iarmhair a chinneadh ar bhealach cosúil leis an modh a dhéantar de ghnáth ar BDDE sa táirge deiridh.
Tá meáchan móilíneach de ~1,368,000 Da (modh Laurent) 18 ag an salann sóidiam a fhaightear de HA (Shiseido Co., Ltd., Tóiceo, an tSeapáin) 18 agus slaodacht intreach de 2.20 m3/kg.Maidir leis an imoibriú trasnasctha, ceannaíodh BDDE (≥95%) ó Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, SAM).Ceannaíodh salanda maolánach fosfáite le pH 7.4 ó Sigma-Aldrich Company.Ceannaíodh gach tuaslagóir, aicéataitrile agus uisce a úsáideadh san anailís LC-MS ó chaighdeán grád HPLC.Ceannaítear aigéad formach (98%) mar ghrád imoibrí.
Rinneadh na turgnaimh go léir ar chóras UPLC Acquity (Waters, Baile na nGallóglach, MA, SAM) agus cheangail iad le mais-speictriméadar ceathairpholach trí-pháirc API 3000 atá feistithe le foinse ianaithe leictrispré (AB SCIEX, Framingham, MA, SAM).
Tosaíodh ar shintéis na hidrigéil HA tras-nasctha trí 198 mg de BDDE a chur le tuaslagán hyaluronate sóidiam 10% (w / w) i láthair alcaile 1% (hiodrocsaíd sóidiam, NaOH).Ba é an tiúchan BDDE deiridh sa mheascán imoibriúcháin ná 9.9 mg/mL (0.049 mM).Ansin, rinneadh an meascán imoibriúcháin a mheascadh go maith agus a aonchineálú agus lig dó dul ar aghaidh ag 45 ° C ar feadh 4 huaire an chloig.19 Coimeádtar pH an imoibrithe ag ~12.
Ina dhiaidh sin, nitear an meascán imoibrithe le huisce, agus rinneadh an hidrogel HA-BDDE deiridh a scagadh agus a chaolú le maolán PBS chun tiúchan HA de 10 go 25 mg / mL a bhaint amach, agus pH deiridh de 7.4.Chun na hidrea-ghéill tras-nasctha a tháirgtear a steiriliú, déantar na hidrigilití seo go léir a uathchlátáil (120°C ar feadh 20 nóiméad).Stóráiltear an hidrogel íonaithe BDDE-HA ag 4°C go dtí go ndéantar anailís air.
Chun anailís a dhéanamh ar an BDDE atá i láthair sa táirge tras-nasctha HA, rinneadh sampla 240 mg a mheá agus a thabhairt isteach sa pholl sa lár (Microcon®; Merck Millipore, Billerica, MA, USA; toirt 0.5 mL) agus lártheifneoirithe ag 10,000 rpm ag teocht an tseomra. 10 nóiméad.Bailíodh agus rinneadh anailís ar 20 µL de leacht tarraingthe anuas.
D'fhonn anailís a dhéanamh ar chaighdeán BDDE (Sigma-Aldrich Co) faoi choinníollacha alcaileach (1%, 0.1% agus 0.01% NaOH), má chomhlíontar na coinníollacha seo a leanas, is é an sampla leachtach 1:10, 1:100, nó suas le 1:1,000,000 Más gá, bain úsáid as uisce dí-ianaithe MilliQ le haghaidh anailíse.
Maidir leis na hábhair tosaigh a úsáideadh san imoibriú tras-nasctha (HA 2%, H2O, 1% NaOH, agus 0.049 mM BDDE), rinneadh anailís ar 1 mL de gach sampla a ullmhaíodh ó na hábhair seo ag baint úsáide as na coinníollacha anailíse céanna.
Chun sainiúlacht na mbuaiceanna atá sa léarscáil ian a chinneadh, cuireadh 10 µL de thuaslagán caighdeánach BDDE 100 ppb (Sigma-Aldrich Co) leis an sampla 20 µL.Sa chás seo, is é an tiúchan deiridh den chaighdeán i ngach sampla ná 37 ppb.
Ar dtús, ullmhaigh tuaslagán stoic BDDE le tiúchan 11,000 mg/L (11,000 ppm) trí 10 μL de BDDE caighdeánach (Sigma-Aldrich Co) a chaolú le 990 μL uisce MilliQ (dlús 1.1 g/mL).Úsáid an tuaslagán seo chun tuaslagán BDDE 110 µg/L (110 ppb) a ullmhú mar chaolú caighdeánach idirmheánach.Ansin, bain úsáid as caolaitheoir caighdeánach BDDE idirmheánach (110 ppb) chun an cuar caighdeánach a ullmhú tríd an caolaitheoir idirmheánach a chaolú arís agus arís eile chun an tiúchan atá ag teastáil de 75, 50, 25, 10, agus 1 ppb a bhaint amach.Mar a léirítear i bhFíor 1, faightear amach go bhfuil líneacht mhaith ag cuar caighdeánach BDDE ó 1.1 go 110 ppb (R2> 0.99).Rinneadh an cuar caighdeánach arís agus arís eile i gceithre thurgnamh neamhspleácha.
Fíor 1 Cuar caighdeánach calabrúcháin BDDE a fuarthas trí anailís LC-MS, ina bhfuil comhghaol maith faoi deara (R2> 0.99).
Giorrúcháin: BDDE, éitear diglycidyl 1,4-butanediol;LC-MS, crómatagrafaíocht leachta agus mais-speictriméadracht.
D'fhonn na caighdeáin BDDE atá i láthair sa HA tras-nasctha agus na caighdeáin BDDE sa réiteach bonn a aithint agus a chainníochtú, baineadh úsáid as anailís LC-MS.
Baineadh amach an scaradh crómatagrafach ar cholún LUNA 2.5 µm C18(2)-HST (50 × 2.0 mm2; Phenomenex, Torrance, CA, SAM) agus coinníodh é ag teocht an tseomra (25 ° C) le linn na hanailíse.Is éard atá sa chéim soghluaiste ná acetonitrile (tuaslagóir A) agus uisce (tuaslagóir B) ina bhfuil aigéad formach 0.1%.Tá an chéim mhóibíleach scaoilte ag elution grádán.Is é seo a leanas an grádán: 0 nóiméad, 2% A;1 nóiméad, 2% A;6 nóiméad, 98% A;7 nóiméad, 98% A;7.1 nóiméad, 2% A;10 nóiméad , 2% A. Is é 10 nóiméad an t-am reatha agus is é 20 µL toirt an insteallta.Tá am coinneála BDDE thart ar 3.48 nóiméad (idir 3.43 agus 4.14 nóiméad bunaithe ar thurgnaimh).Rinneadh an chéim shoghluaiste a phumpáil ag ráta sreafa 0.25 mL/nóiméad le haghaidh anailíse LC-MS.
Le haghaidh anailíse agus cainníochtaithe BDDE ag MS, déantar an córas UPLC (Uisce) a chomhcheangal le mais-speictriméadar ceathairpholach trí-pháirc API 3000 (AB SCIEX) atá feistithe le foinse ianaithe leictreaspra, agus déantar an anailís i mód ian dearfach (ESI+).
De réir na hanailíse blúire ian a rinneadh ar BDDE, socraíodh gurb é an blúire leis an déine is airde an blúire a fhreagraíonn do 129.1 Da (Fíor 6).Mar sin, sa mhodh monatóireachta il-ian (MIM) don chainníochtú, is é 203.3/129.1 Da comhshó mais (cóimheas mais-go-luchta [m/z]) BDDE.Úsáideann sé modh scanadh iomlán (FS) agus modh scanadh ian táirge (PIS) freisin le haghaidh anailíse LC-MS.
D'fhonn sainiúlacht an mhodha a fhíorú, rinneadh anailís ar shampla bán (an chéim tosaigh soghluaiste).Níor aimsíodh aon chomhartha sa sampla bán le mais chomhshó 203.3/129.1 Da.Maidir le atrialltacht an turgnaimh, rinneadh anailís ar 10 n-instealladh caighdeánach de 55 ppb (i lár an chuar calabrúcháin), rud a d'eascair diall caighdeánach iarmharach (RSD) <5% (sonraí nach bhfuil léirithe).
Rinneadh an t-ábhar iarmharach BDDE a chainníochtú in ocht hidrogel HA tras-nasctha BDDE uathchlábhaithe éagsúla, a fhreagraíonn do cheithre thurgnaimh neamhspleácha.Mar a thuairiscítear sa rannán “Ábhair agus Modhanna”, déantar an cainníochtú a mheas trí mheánluach chuar aischéimniúcháin an chaolaithe chaighdeánaigh BDDE, a fhreagraíonn don bhuaic uathúil a braitheadh ag trasdul mais BDDE de 203.3/129.1 Da, le coinneáil. am 3.43 go 4.14 nóiméad Gan fanacht.Taispeánann Fíor 2 crómatagram samplach den chaighdeán tagartha BDDE 10 ppb.Déanann Tábla 1 achoimre ar an ábhar BDDE iarmharach in ocht hidrigine éagsúla.Is é an raon luacha ná 1 go 2.46 ppb.Mar sin, tá an tiúchan BDDE iarmharach sa sampla inghlactha le húsáid ag an duine (<2 ppm).
Fíor 2 Crómatagram ian de chaighdeán tagartha BDDE 10 ppb (Sigma-Aldrich Co), trasdul MS (m/z) a fuarthas trí anailís LC-MS de 203.30/129.10 Da (i mód MRM deimhneach).
Giorrúcháin: BDDE, éitear diglycidyl 1,4-butanediol;LC-MS, crómatagrafaíocht leachta agus mais-speictriméadracht;MRM, monatóireacht ar fhrithghníomhartha iolracha;MS, mais;m/z, cóimheas mais-le-lucht.
Nóta: Is hidrigiléil HA tras-nasctha BDDE iad samplaí 1-8.Tuairiscítear freisin méid iarmharach BDDE sa hidrogel agus buaic ama coinneála BDDE.Ar deireadh, tuairiscítear freisin go bhfuil buaicphointí nua ann le hamanna coinneála éagsúla.
Giorrúcháin: BDDE, éitear diglycidyl 1,4-butanediol;HA, aigéad hyaluronic;MRM, monatóireacht ar fhrithghníomhartha iolracha;tR, am coinneála;LC-MS, crómatagrafaíocht leachta agus mais-speictriméadracht;RRT, am coinneála coibhneasta.
Is ionadh é, léirigh an anailís ar chrómatagram ian LC-MS, bunaithe ar na samplaí hidrogel HA tras-nasctha go léir a ndearnadh anailís orthu, go raibh buaic bhreise ag an am coinneála níos giorra de 2.73 go 3.29 nóiméad.Mar shampla, léiríonn Fíor 3 an crómatagram ian de shampla tras-nasctha HA, áit a bhfuil buaic bhreise le feiceáil ag am coinneála difriúil de thart ar 2.71 nóiméad.Fuarthas amach gurbh é 0.79 (Tábla 1) an t-am coinneála coibhneasta breathnaithe (RRT) idir an bhuaic a breathnaíodh le déanaí agus an bhuaicphointe ó BDDE.Ós rud é go bhfuil a fhios againn go bhfuil an buaic nua a breathnaíodh níos lú coinnithe sa cholún C18 a úsáidtear san anailís LC-MS, féadfaidh an buaic nua a bheith ag freagairt do chomhdhúil níos polar ná BDDE.
Fíor 3 Crómatagram ian de shampla hidrogel HA tras-nasctha faighte ag LC-MS (tiontú mais MRM 203.3/129.0 Da).
Giorrúcháin: HA, aigéad hyaluronic;LC-MS, crómatagrafaíocht leachta agus mais-speictriméadracht;MRM, monatóireacht ar fhrithghníomhartha iolracha;RRT, am coinneála coibhneasta;tR, am coinneála.
Chun a chur as an áireamh go bhféadfadh na beanna nua a breathnaíodh a bheith ina ábhar salaithe a bhí i láthair ar dtús sna hamhábhair a úsáideadh, rinneadh anailís ar na hamhábhair sin freisin ag baint úsáide as an modh anailíse LC-MS céanna.Áirítear ar na hábhair tosaigh a ndearnadh anailís orthu uisce, 2% NaHA in uisce, 1% NaOH in uisce, agus BDDE ag an tiúchan céanna a úsáidtear san imoibriú tras-nasctha.Níor léirigh crómatagram ian an ábhair tosaigh a úsáideadh aon chomhdhúil nó buaic, agus comhfhreagraíonn a chuid ama coinneála don bhuaic nua a breathnaíodh.Ní hé amháin go gcaitheann an fíric seo an smaoineamh nach amháin go bhféadfadh comhdhúile nó substaintí a d’fhéadfadh cur isteach ar an nós imeachta anailíse a bheith san ábhar tosaigh, ach nach bhfuil aon chomhartha ann go bhféadfadh tras-éilliú a bheith ann le táirgí saotharlainne eile.Taispeántar na luachanna tiúchana a fuarthas tar éis anailís LC-MS ar BDDE agus beanna nua i dTábla 2 (samplaí 1-4) agus an crómatagram ian i bhFíor 4.
Nóta: Freagraíonn samplaí 1-4 do na hamhábhair a úsáidtear chun hidrigiléil HA tras-nasctha BDDE uathchlábhaithe a tháirgeadh.Ní dhearnadh uathchlátáil ar na samplaí seo.
Giorrúcháin: BDDE, éitear diglycidyl 1,4-butanediol;HA, aigéad hyaluronic;LC-MS, crómatagrafaíocht leachta agus mais-speictriméadracht;MRM, monatóireacht ar fhrithghníomhartha iolracha.
Freagraíonn Fíor 4 do chrómatagram LC-MS sampla den amhábhar a úsáidtear in imoibriú tras-nasctha HA agus BDDE.
Nóta: Déantar iad seo go léir a thomhas ag an tiúchan agus an cóimheas céanna a úsáidtear chun an t-imoibriú trasnasctha a dhéanamh.Freagraíonn na huimhreacha do na hamhábhair a ndearna an crómatagram anailís orthu: (1) uisce, (2) tuaslagán uiscí 2% HA, (3) tuaslagán uiscí 1% NaOH.Déantar anailís LC-MS chun mais chomhshó 203.30/129.10 Da (i mód MRM deimhneach).
Giorrúcháin: BDDE, éitear diglycidyl 1,4-butanediol;HA, aigéad hyaluronic;LC-MS, crómatagrafaíocht leachta agus mais-speictriméadracht;MRM, monatóireacht ar fhrithghníomhartha iolracha.
Rinneadh staidéar ar na coinníollacha a bhí mar thoradh ar fhoirmiú beanna nua.D'fhonn staidéar a dhéanamh ar an tionchar a bhíonn ag na coinníollacha imoibrithe a úsáidtear chun hidrogel HA tras-nasctha a tháirgeadh ar imoibríocht an ghníomhaire tras-nasctha BDDE, rud a fhágann go gcruthófar beanna nua (seachtháirgí féideartha), rinneadh tomhais éagsúla.Sna cinntí seo, rinneamar staidéar agus anailís ar an traslinker BDDE deiridh, a déileáladh le tiúchain éagsúla NaOH (0%, 1%, 0.1%, agus 0.01%) i meán uiscí, ina dhiaidh sin nó gan uathchlátáil.Tá nós imeachta na baictéir chun na coinníollacha céanna a insamhladh mar an gcéanna leis an modh a úsáidtear chun hidrogel HA tras-nasctha a tháirgeadh.Mar a thuairiscítear sa rannán “Ábhair agus Modhanna”, rinne LC-MS anailís ar oll-aistriú an tsampla go 203.30/129.10 Da.Ríomhtar an BDDE agus tiúchan an bhuaic nua, agus léirítear na torthaí i dTábla 3. Níor aimsíodh aon bhuaiceanna nua sna samplaí nach ndearnadh autoclaved orthu, beag beann ar láithreacht NaOH sa réiteach (samplaí 1-4, Tábla 3).Maidir le samplaí autoclaved, ní aimsítear beanna nua ach amháin i láthair NaOH sa réiteach, agus is cosúil go bhfuil foirmiú an bhuaic ag brath ar thiúchan NaOH sa réiteach (samplaí 5-8, Tábla 3) (RRT = 0.79).Taispeánann Figiúr 5 sampla de chrómatagram ian, a thaispeánann dhá shampla uathchlábhaithe i láthair nó in easnamh NAOH.
Giorrúcháin: BDDE, éitear diglycidyl 1,4-butanediol;LC-MS, crómatagrafaíocht leachta agus mais-speictriméadracht;MRM, monatóireacht ar fhrithghníomhartha iolracha.
Nóta: An crómatagram barr: Cóireáladh an sampla le tuaslagán uiscí 0.1% NaOH agus uathclaíodh é (120°C ar feadh 20 nóiméad).Crómatagram bun: Níor déileáladh leis an sampla le NaOH, ach uathclaíodh é faoi na coinníollacha céanna.Rinne LC-MS anailís ar chomhshó maise 203.30/129.10 Da (i mód MRM deimhneach).
Giorrúcháin: BDDE, éitear diglycidyl 1,4-butanediol;LC-MS, crómatagrafaíocht leachta agus mais-speictriméadracht;MRM, monatóireacht ar fhrithghníomhartha iolracha.
I ngach sampla autoclaved, le NaOH nó gan é, laghdaíodh an tiúchan BDDE go mór (suas le 16.6 uair) (samplaí 5-8, Tábla 2).D'fhéadfadh an laghdú ar thiúchan BDDE a bheith mar gheall ar an bhfíric gur féidir le huisce gníomhú mar bhonn (núicléafile) ag teochtaí arda chun fáinne eapocsaíde BDDE a oscailt chun cumaisc 1,2-diol a fhoirmiú.Tá cáilíocht mhonaiseatópach an chomhdhúil seo difriúil le cáilíocht BDDE agus mar sin ní bheidh aon tionchar uirthi.Bhraith LC-MS aistriú maise 203.30/129.10 Da.
Ar deireadh, léiríonn na turgnaimh seo go mbraitheann giniúint buaiceanna nua ar láithreacht BDDE, NAOH, agus ar an bpróiseas autoclaving, ach nach bhfuil baint ar bith aige le HA.
Ba shaintréith an bhuaic nua a fuarthas ag am coinneála thart ar 2.71 nóiméad ansin ag LC-MS.Chun na críche sin, goradh BDDE (9.9 mg/mL) i dtuaslagán uiscí 1% NaOH agus uathclaveadh.I dTábla 4, cuirtear tréithe an bhuaic nua i gcomparáid leis an mbuaic thagartha BDDE atá ar eolas (am coinneála thart ar 3.47 nóiméad).Bunaithe ar an anailís ilroinnt ian ar an dá bhuaic, is féidir a thabhairt i gcrích go léiríonn an buaic le ham coinneála de 2.72 nóiméad na blúirí céanna le buaic BDDE, ach le déine éagsúla (Fíor 6).Maidir leis an mbuaic a fhreagraíonn don am coinneála (PIS) de 2.72 nóiméad, breathnaíodh buaic níos déine tar éis ilroinnt ag mais 147 Da.Ag an tiúchan BDDE (9.9 mg/mL) a úsáideadh sa chinneadh seo, breathnaíodh freisin modhanna ionsúite éagsúla (UV, λ = 200 nm) sa speictream ultraivialait tar éis scaradh crómatagrafach (Fíor 7).Tá an buaic le ham coinneála de 2.71 nóiméad fós le feiceáil ag 200 nm, agus ní féidir buaic BDDE a fheiceáil sa chromatogram faoi na coinníollacha céanna.
Tábla 4 Torthaí saintréithe an bhuaic nua le ham coinneála de thart ar 2.71 nóiméad agus buaic BDDE le ham coinneála de 3.47 nóiméad
Nóta: Chun na torthaí seo a fháil, rinneadh anailísí LC-MS agus HPLC (MRM agus PIS) ar an dá bhuaic.Le haghaidh anailíse HPLC, úsáidtear braite UV le tonnfhad 200 nm.
Giorrúcháin: BDDE, éitear diglycidyl 1,4-butanediol;HPLC, crómatagrafaíocht leacht ardfheidhmíochta;LC-MS, crómatagrafaíocht leachta agus mais-speictriméadracht;MRM, monatóireacht ar fhrithghníomhartha iolracha;m/z, cóimheas mais-le-lucht;PIS, scanadh ian táirge;solas ultraivialait, solas ultraivialait.
Nóta: Faightear na blúirí mais trí anailís LC-MS (PIS).Crómatagram barr: mais-speictream de bhlúirí samplacha caighdeánacha BDDE.Crómatagram bun: Is é mais-speictream an bhuaic nua a braitheadh (RRT a bhaineann le buaic BDDE ná 0.79).Próiseáladh BDDE i dtuaslagán 1% NaOH agus uathclaíodh é.
Giorrúcháin: BDDE, éitear diglycidyl 1,4-butanediol;LC-MS, crómatagrafaíocht leachta agus mais-speictriméadracht;MRM, monatóireacht ar fhrithghníomhartha iolracha;PIS, scanadh ian táirge;RRT, am coinneála coibhneasta.
Fíor 7 Crómatagram ian den ian réamhtheachtaithe 203.30 Da, agus (A) an buaic nua le ham coinneála de 2.71 nóiméad agus (B) braite UV buaic chaighdeán tagartha BDDE ag 3.46 nóiméad ag 200 nm.
Sna hidrogels HA tras-nasctha go léir a tháirgtear, tugadh faoi deara go raibh an tiúchan BDDE iarmharach tar éis cainníochtú LC-MS <2 ppm, ach bhí buaic nua anaithnid le feiceáil san anailís.Ní hionann an bhuaic nua seo agus táirge caighdeánach BDDE.Tá an táirge caighdeánach BDDE tar éis dul faoi anailís tiontaithe cáilíochta céanna (tiontú MRM 203.30/129.10 Da) sa mhodh dearfach MRM freisin.Go ginearálta, úsáidtear modhanna anailíse eile cosúil le crómatagrafaíocht mar thástálacha teorann chun BDDE a bhrath i hidrogels, ach tá an teorainn braite uasta (LOD) beagán níos ísle ná 2 ppm.Ar an láimh eile, go dtí seo, baineadh úsáid as NMR agus MS chun an méid tras-nasctha agus/nó modhnaithe HA a shainiú sna blúirí aonad siúcra de tháirgí tras-nasctha HA.Ní raibh sé mar chuspóir ag na teicníochtaí seo riamh braite BDDE iarmharach a chainníochtú ag tiúchan chomh híseal mar a thuairiscímid san alt seo (LOD dár modh LC-MS = 10 ppb).
Am postála: Meán Fómhair-01-2021